Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer

A) Prinzip des BRET und BRET². B) Emissionsspektren von Donor und Akzeptor bei BRET und BRET².

Der Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer (engl. Bioluminescence resonance energy transfer, kurz BRET) ist ein physikalischer Prozess der strahlungsfreien Energieübertragung, der auf dem Förster resonance energy transfer (FRET) beruht. Bei diesem Prozess wird Biolumineszenzenergie strahlungsfrei auf einen Fluoreszenzfarbstoff (Akzeptor-Fluorophor) übertragen. Da die Intensität des Bioluminescence resonance energy transfers unter anderem vom Abstand der Biolumineszenzquelle und des Akzeptor-Fluorophors abhängt, wird der Bioluminescence resonance energy transfer oft als Alternative zum Fluorescence resonance energy transfer als „optisches Nanometermaß“ insbesondere in der Biochemie und der Zellbiologie eingesetzt.^[1] Als Biolumineszenzquelle findet insbesondere das Enzym Rluc, eine Luciferase aus der Seefedernart Renilla reniformis (gemeine Seefeder), unter Verwendung ihres Substrats Coelenterazin h und als Akzeptor-Fluorophor das Gelb fluoreszierende Protein YFP Anwendung. Eine Weiterentwicklung dieser klassischen BRET-Methode ist die BRET²-Methode, die auf der Verwendung des Substrats Coelenterazin 400a (DeepBlue C) und des Akzeptors GFP² beruht.^[2].

Einzelnachweise

↑ Pfleger K.D., Eidne K.A. (2006): Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET). In: Nat. Methods. 3:165-174. PMID 16489332 doi:10.1038/nmeth841
↑ Dionne P., Mireille C., Labonte A., Carter-Allen K., Houle B., Joly E., Taylor S.C., Menard L. (2002): BRET2: Efficient energy transfer from Renilla Luciferase to GFP2 to measure protein–protein interactions and intracellular signaling events in live cells. In: Luminescence Biotechnology: Instruments and Applications. (van Dyke K., van Dyke C., Woodfork K., ed), S. 539–555, CRC Press, Boca Raton, USA.

[1] Pfleger K.D., Eidne K.A. (2006): Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET). In: Nat. Methods. 3:165-174. PMID 16489332 doi:10.1038/nmeth841

[2] Dionne P., Mireille C., Labonte A., Carter-Allen K., Houle B., Joly E., Taylor S.C., Menard L. (2002): BRET2: Efficient energy transfer from Renilla Luciferase to GFP2 to measure protein–protein interactions and intracellular signaling events in live cells. In: Luminescence Biotechnology: Instruments and Applications. (van Dyke K., van Dyke C., Woodfork K., ed), S. 539–555, CRC Press, Boca Raton, USA.

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